Stbl3化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞(不穩(wěn)定DNA轉(zhuǎn)化)
簡要描述:
Stbl3化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞(不穩(wěn)定DNA轉(zhuǎn)化):Stbl3菌株來源于大腸桿菌HB101菌株,特別適用于克隆不穩(wěn)定插入片段比如含有直接重復(fù)序列的慢病毒DNA。本品是Stbl3菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品時間:2024-03-21
Stbl3 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品標(biāo)簽:
Stbl3;Stbl2;HB101;Stable;Direct repeats 直接重復(fù)片段;Lentiviral expression vectors 慢病毒表達(dá)載體;In-fusion 一步法克隆檢測試劑盒;
產(chǎn)品訂購:
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
MF2317-1000UL | Stbl3 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl | 280 |
MF2317-5000UL | Stbl3 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 50×100μl | 1280 |
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產(chǎn)品組分:
組分編號 | 組分名稱 | 貨號(規(guī)格) | |
MF2317-1000UL | MF2317-5000UL | ||
MF2317-A | Stbl3 Competent Cell | 10×100μl | 50×100μl |
MF2317-B | Control Plasmid puC19, 10 pg/µl | 10μl | 10μl |
菌株描述
Stbl3菌株來源于大腸桿菌HB101菌株,特別適用于克隆不穩(wěn)定插入片段比如含有直接重復(fù)序列的慢病毒DNA。與*0菌株不同,Stbl3菌株減少了存在于慢病毒表達(dá)載體和一些其他腺病毒載體中長末端重復(fù)序列(LTRs)的同源重組頻率,有效降低錯誤重組。Stbl3有更高的基因組克隆容量。此菌株含鏈霉素抗性。
Stbl3菌株基因型:F-mcrB mrrhsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ-leumtl-1
產(chǎn)品描述
本品是Stbl3菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。
注意事項(xiàng)
1) 對不穩(wěn)定DNA克隆或逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒載體克隆,涂板后應(yīng)在30℃培養(yǎng),以減少錯誤重組的發(fā)生概率。
2) 制備高純度病毒質(zhì)粒,需使用新鮮轉(zhuǎn)化的平板接菌,新鮮菌液提取質(zhì)粒,菌液不可低溫保存后使用。
3) 對不穩(wěn)定的克隆或病毒質(zhì)粒優(yōu)先以質(zhì)粒狀態(tài)保存,盡量避免以轉(zhuǎn)化在大腸桿菌細(xì)胞的方式保存質(zhì)粒。
4) 轉(zhuǎn)化時SOC或LB培養(yǎng)基均可用,前者能提高轉(zhuǎn)化效率約20%。
5) 感受態(tài)細(xì)胞必須用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃保存,不可反復(fù)凍融且放置時間過長,否則會減低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
6) 醉好在冰上融化感受態(tài)細(xì)胞。
7) 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時,需在相應(yīng)溫度及無菌條件下進(jìn)行。
8) 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功,可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化,將損失降到zui低。
9) 產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10 pg/μl),供對照實(shí)驗(yàn)用。
10)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Stbl3感受態(tài)細(xì)胞常見問題【詳細(xì)問題請見懋康網(wǎng)站MKbio介紹】
1. 使用Stbl3感受態(tài)細(xì)胞時,如何提高病毒質(zhì)粒的產(chǎn)量?
2. 是否能用*0或DH5α代替Stable或Stbl3擴(kuò)繁病毒質(zhì)粒?
3. 使用Stbl3,*0感受態(tài)細(xì)胞構(gòu)建或擴(kuò)增病毒質(zhì)粒時,平板上長出的克隆有的偏大,有的偏小,如何選擇哪種克隆用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)?
4. Stbl3的基因型為F-mcrB mrrhsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (StrR) xyl-5 λ-leu mtl-1,如何理解各個基因?
5. 轉(zhuǎn)化過程中感受態(tài)細(xì)胞的復(fù)蘇必須使用SOC培養(yǎng)基?
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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Stbl3化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞(不穩(wěn)定DNA轉(zhuǎn)化)
Stbl3化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞(不穩(wěn)定DNA轉(zhuǎn)化)