Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針
簡要描述:
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針染料由Leslie Loew和同事開發(fā),是靈敏且穩(wěn)定的快速響應探針,能檢測亞毫秒級的膜電位變化。Di-4-ANEPPS(MX4038)和Di-8-ANEPPS(MX4039)在各種組織、細胞和模型膜系統(tǒng)中表現(xiàn)出相當一致的熒光強度變化率(10%熒光變化/100mV)
產(chǎn)品時間:2021-07-12
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針
溫馨提示:見我司懋康生物(MKBio)整理的膜電位熒光探針(Probes for Membrane Potential)產(chǎn)品專題。
搜索關(guān)鍵詞:
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訂購信息:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針 | MX4038-5MG | 5mg | 2290 |
產(chǎn)品描述:
ANEP (AminoNaphthylEthenylPyridinium)染料由Leslie Loew和同事開發(fā),是靈敏且穩(wěn)定的快速響應探針,能檢測亞毫秒級的膜電位變化。Di-4-ANEPPS(MX4038)和Di-8-ANEPPS(MX4039)在各種組織、細胞和模型膜系統(tǒng)中表現(xiàn)出相當一致的熒光強度變化率(10%熒光變化/100mV)。ANEP染料的電子結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,從而,它們的熒光光譜對周圍的電場變化做出響應。這些光學響應足夠快來檢測興奮細胞(包括單個神經(jīng)元、心肌細胞和完整組織制備物)的瞬時電位變化。另外,ANEP染料的激發(fā)光譜呈現(xiàn)出電位依賴的遷移,從而使其能通過測定激發(fā)波長下的熒光比來定量膜電位。ANEP染料結(jié)構(gòu)上的差異使其適用于各種特定應用(見附錄I和II)。
電位敏感ANEP染料的特征:
① 兩性離子分子,在不同細胞和組織樣本中表現(xiàn)出穩(wěn)定的電位響應。
② 結(jié)合到磷脂膜上的大激發(fā)和發(fā)射波長約為465/635nm【但光譜特征與環(huán)境密切關(guān)聯(lián)】
③ 非熒光直至結(jié)合到膜上
④ 溶于乙醇、DMSO和DMF【Di-2-ANEPEQ(MX4040)是水溶性的ANEP染料】
⑤ 快速響應探針,適用于檢測亞毫秒的膜電位變化
Di-4-ANEPPS是各種細胞和組織類型中表現(xiàn)穩(wěn)定的電位探針。細胞膜電位的變化與染料激發(fā)熒光強度的變化相關(guān)。Di-4-ANEPPS能快速被細胞內(nèi)在化,因此,主要用于短期實驗。我司(懋康生物)也提供Di-8-ANEPPS(MX4039),親脂性更好且能更好的保留在質(zhì)膜外層。
基本特性:
1) CAS NO:90134-00-2
2) 化學名:Pyridinium, 4-(2-(6-(dibutylamino)-2-naphthalenyl)ethenyl)-1-(3-sulfopropyl)-, hydroxide, inner salt
3) 分子式:C28H36N2O3S
4) 分子量:480.66 g/mol
5) 外觀:橙色至暗紅色固體
6) 純度:≥95%(HPLC)
7) 熒光:λex 496 nm, λem 705 nm in methanol【需注意:相較于在有機溶劑內(nèi),苯乙烯染料與脂質(zhì)結(jié)合后通常發(fā)生很大的藍光遷移】
8)溶解性:溶于DMSO、乙醇、DMF
1)熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 儲存液制備
將低溫保存的凍干粉置于室溫回溫至少20min,低速離心后,將其溶于有機溶劑比如乙醇、DMSO或DMF配制成1mg/ml(~2mM)的儲存液。將儲存液避光保存在+4℃。
2. ANEP染料的細胞加載
2.1 批量加載
爬片培養(yǎng)的貼壁細胞一般通過將少量的染料儲存液(比如溶于DMSO)加入細胞培養(yǎng)基(終濃度為0.2-2μM)進行標記即可。更高的染料濃度(10-50μM)用于標記灌注的組織樣本。通常要加0.05% Pluronic® F-127(MS4301)在標記溶液內(nèi),以提高染料的溶解(對于親脂性更高的ANEP染料比如Di-8-ANEPPS尤其不能省略)。低標記溫度(4-20℃)能抑制染料的內(nèi)在化。含探針的溶液孵育10-20min,細胞用不含染料的培養(yǎng)基清洗3次。
2.2 逆行標記
特定的神經(jīng)元群細胞可通過定位壓力注射高濃度的染料溶液(10-20mg/ml,溶于DMSO或乙醇)進入神經(jīng)組織來實現(xiàn)標記。
3. 熒光測定
一般通過記錄激發(fā)在450nm和510nm,發(fā)射在>570nm處的熒光強度來進行熒光比率成像測定。當膜超極化,熒光強度比率(F450/F510)降低。電位響應的校準可通過使用離子載體纈氨霉素(MS0049)和添加不同鉀離子濃度到細胞外培養(yǎng)基來調(diào)整多種膜電位來實現(xiàn)。
相關(guān)產(chǎn)品
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
MX4038-5MG | Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針 | 5mg |
MX4039-5MG | Di-8-ANEPPS 膜電位熒光探針 | 5mg |
MX4040-5MG | Di-2-ANEPEQ (JPW 1114) 膜電位熒光探針 | 5mg |
MS4301-1G | Pluronic® F-127, Cell Culture Tested 細胞培養(yǎng)級 | 1g |
MS4302-1ML | Pluronic® F-127 (20% Solution in DMSO), Cell Culture Tested | 1ml |
MS4601A-100ML | Dimethyl Sulfoxide (DMSO), Cell Culture Tested 二甲基亞砜(細胞培養(yǎng)級) | 100ml |
MS0049-10MG | Valinomycin 纈氨霉素 | 10mg |
——Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針